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布鲁氏菌病疫苗免疫接种技术指南

为做好畜间布病免疫工作，按照《河南省畜间布鲁氏菌病防控五年行动方案（2022－2026年）》要求，特制定本技术指南。

1 疫苗选择

1.1 布鲁氏菌病活疫苗A19株

适用于牛。皮下注射免疫。不可用于孕畜。

1.2 布氏菌病活疫苗（A19-ΔVirB12株）

适用于牛。皮下注射免疫。不可用于孕畜和种公畜。本疫苗免疫后15-180日，用布鲁氏菌ELISA(VirB12)检测法可区分疫苗免疫与野毒感染抗体。

1.3 布鲁氏菌病活疫苗S2株

适用于羊、牛。口服免疫、皮下或肌肉注射免疫，口服可用于孕畜，注射免疫法不能用于孕畜、牛和小尾寒羊。

1.4 布鲁氏菌基因缺失活疫苗（M5-90Δ26株）

适用于羊。皮下注射免疫，不可用于孕畜及种公畜。本疫苗免疫后15~180日，用布鲁氏菌bp26–iELISA检测法可区分疫苗免疫与野毒感染抗体。

2 免疫程序

2.1 羊

2.1.1 布鲁氏菌病活疫苗S2株

口服免疫、皮下或肌肉注射免疫。口服免疫：山羊和绵羊，初免后1～3个月加强免疫一次，以后每年口服免疫一次；免疫剂量：羊一头份/只（≥1.0×1010CFU活菌/只）。注射免疫：皮下或股肉注射均可，初免后1～3个月加强免疫一次，以后每年免疫一次；山羊1/4头份/只（≥2.5×109CFU活菌/只)；绵羊1/2头份/只（≥5.0×109CFU活菌/头)。具体用法、用量参见产品说明书。

2.1.2 布鲁氏菌基因缺失活疫苗（M5-90Δ26株）

3月龄以上健康羊在配种前 2~3 月期间接种，腿部或颈部皮下注射，每只接种 1 头份(每头份≥1.0×109CFU活菌/只)。以后每年接种一次。具体用法、用量参见产品说明书。

2.2 牛

2.2.1 布鲁氏菌病活疫苗S2株

全群口服，初免后1～3个月加强免疫一次，以后每年口服免疫一次。免疫剂量：牛5头份/头（≥5.0×1010CFU活菌/头）；具体用法、用量参见产品说明书。

2.2.2 布鲁氏菌病活疫苗A19株

3-8月龄牛免疫，腿部或颈部皮下注射，免疫剂量：犊牛1头份/头（≥6.0×1010CFU活菌/头）；必要时可在18～20月龄（即第1次配种前）再接种1次，免疫剂量为1/60头份/头～1/20头份/头（1.0×109CFU～3.0×109CFU活菌/头)，产奶前可不再免疫；以后可根据牛群布鲁氏菌病流行情况决定是否再进行接种。具体用法、用量参见产品说明书。

2.2.3 布氏菌病活疫苗（A19-ΔVirB12株）

3-8月龄牛免疫，腿部或颈部皮下注射，免疫剂量： 1头份/头（6.0×1010-11.0×1010CFU活菌/头)；免疫期为12个月，每年免疫1次。具体用法、用量参见产品说明书。

3 免疫前的准备

3.1 免疫时间

免疫应避开炎热天气、高温季节、刮风和怀孕、分娩高峰期，可选择在9～11月份进行免疫。

3.2 人员要求

3.2.1 应掌握布鲁氏菌病危害及防控等相关专业知识，了解布鲁氏菌病免疫及应急处置等操作过程中可能存在的风险、对人员和环境的危害以及人员防护措施。

3.2.2 具备免疫及应急处置等相关技能，并能熟练操作。

3.2.3 人员的资质和数量应能满足所开展工作需要。

3.2.4 操作人员进行免疫操作期间，禁止用手接触面部，禁止饮食、吸烟，禁止接听电话，谨防针头等尖锐物品刺伤或划伤。

3.2.5 可能接触到布鲁氏菌的相关人员在就餐、回家、办公之前宜先洗澡更衣。

3.2.6 操作人员保证手部、胳膊和面部等容易暴露的部位不存在伤口。

3.3 防护用品

N95 口罩、一次性 PE 手套、医用丁腈检查手套、长臂乳胶手套、防护帽、护目镜、工作服、防护服（带拇指环）、防水长筒胶靴等。

3.4 免疫器械

3.4.1 口服免疫

免疫时应使用布鲁氏菌病疫苗专用全封闭式投药器或连续注射投药枪。使用前，先对投药器或投药枪各部位进行仔细检查，并用清水进行调试，以确保其完好、严密、无堵塞。

3.4.2 皮下注射免疫

一次性注射器或连续注射器，如采用一次性注射器，需做到一畜一针头、对连续注射器做到一畜一消毒。

3.5 消毒药品

3.5.1 布鲁氏菌病免疫、采样时畜舍压尘消毒药：0.1 %新洁尔灭或2 %～3 %的氢氧化钠或20 %二氯异氰尿酸钠等。

3.5.2 操作人员手、皮肤消毒药：0.1 %新洁尔灭、75 %酒精。

3.5.3 免疫、采样时动物体表消毒：75 %酒精。

3.5.4 可重复利用的防护物品浸泡、擦拭用消毒药：0.1 %～0.3 %新洁尔灭。

3.5.5 一次性防护用品、耗材、器具消毒药：1 %～2 %的氢氧化钠。

3.5.6 被污染的地面，扑杀、深埋无害化处理场所用消毒药：2 %氢氧化钠或10 %～20 %的石灰乳悬液。

3.6 穿戴防护用品

3.6.1 可能接触布鲁氏菌的人员应按照下列顺序穿戴防护用品：内层手套（医用丁腈检查手套）、口罩、帽子、防护服、护目镜、防水长筒胶靴、外层手套（长臂乳胶手套）。

3.6.2 穿戴防护用品前用清水或肥皂水洗手，外层手套套在防护服袖口外面，穿戴内层手套时，将大拇指深入拇指环内，防止手套滑脱。

3.7 场地压尘消毒

喷洒消毒时将喷头高举空中，喷嘴向上以画圆圈方式“先里后外，先上后下，先左后右”的顺序喷洒。喷洒剂量以墙壁、地面均匀湿润和牛羊体表稍湿为宜。

3.8 疫苗稀释

3.8.1 布鲁氏菌病疫苗存放于2-8℃环境中，运输时存放于冷藏箱或加冰保温桶内，避免阳光直射，稀释后的待用疫苗放于冰上，尽量在2小时内用完。

3.8.2 疫苗稀释前认真查看疫苗包装是否完整。包括疫苗名称、免疫剂量、生产厂家及批号、批准文号、保存期、有效期。如出现瓶盖松动、疫苗瓶破裂损坏、超过有效期、色泽与说明不符和物理形状异常等情况时，不得使用。

3.8.3 依据不同的动物种类、疫苗种类和接种途径，严格按照说明书要求配制使用，配制剂量准确。

3.8.4 及时对稀释后未使用完疫苗和问题疫苗进行收集和无害化处理。

4 免疫接种

4.1 操作人员站位

所有在场人员，包括保定人员、免疫及采样人员、畜主、饲养员等均应站在上风向或动物侧面。

4.2 动物保定

4.2.1 羊的保定

保定人员骑胯在羊的肩部，用两腿用力夹住羊的颈部和肩部，同时用两手紧握羊的两角或两耳，羊嘴鼻不能对人、不能左右摆动。或用保定栏固定羊只，使其头部和身体不能移动。

4.2.2 牛的保定

用保定绳或保定栏将牛保定，使其不能移动，用鼻钳的2 个钳嘴钳住2个鼻孔，并迅速夹紧鼻中隔，使牛头朝向正前方。

4.3 免疫操作

4.3.1 采取口服免疫方式时，将投药弯管插入免疫动物口腔深部，喷至咽部或舌底。免疫用的耗材及设备应进行彻底消毒后使用。

4.3.2 采取皮下注射方式时，选择腿部内侧或颈部两侧，左手拇指与食指捏取皮肤成褶皱，右手持注射针管在褶皱底部针头与皮肤呈30～40度角，不宜超过45度角，快速刺入皮肤与肌肉间将疫苗注入。一畜一针头、对重复使用的器械一畜一消毒。

4.4 免疫过程中注意事项

4.4.1动物免疫接种前、后3日内禁止使用抗生素。

4.4.2免疫过程中，操作人员手禁止接触嘴、眼和面部，禁止饮食、吸烟，禁止接听电话，谨防针头等尖锐物品刺伤。

4.5 免疫结束后场地、设施消毒及人员消毒，防护用品脱卸及消毒

4.5.1 场地、设施设备消毒

对场地进行彻底消毒，设施设备在出口处喷洒消毒。废弃的疫苗瓶、稀释后未用完的疫苗、酒精棉球及碘酊棉球等物品放至指定容器，经喷洒消毒后深埋。

4.5.2 人员消毒

对人员采用0.1 %～0.3 %新洁尔灭全身喷雾消毒。

4.5.3 防护用品脱卸顺序及消毒

4.5.3.1 应在养殖场的下风向进行防护用品脱卸，脱卸顺序为：先脱掉防水长筒胶靴、外层手套，用内层手套脱防护服、护目镜、内层帽子，先脱掉一只内层手套后用干净裸手脱口罩，脱最后一只内层手套。

4.5.3.2 对于可重复利用的防护物品，采用0.1 %～0.3 %新洁尔灭浸泡、喷洒或擦拭。对于一次性用品，如使用过的手套、帽子、防护服、注射器、空疫苗瓶及其他接触过污染源的用品，进行121 ℃高压 30 min处理，或者采用 1 %～2 %的氢氧化钠浸泡 30 min 后进行无害化处理。

4.6 免疫档案及记录

建立规范的免疫档案，内容应包括动物的品种、数量、日龄、疫苗名称、疫苗生产厂家、疫苗批号、免疫时间、免疫剂量和免疫操作人员等。

5 应急处置

5.1 免疫应激反应的处置

免疫后如动物出现体温升高、饮食欲减退等应激反应，一般在3日内可自行恢复，严重者可注射肾上腺素、地塞米松等药物，并采取辅助治疗措施。

5.2 疫苗泄漏的处置

5.2.1 口服免疫过程中，如牛羊出现咳嗽、打喷嚏将把刚注入口腔中的疫苗喷出，不慎喷到工作人员身上，应停止作业，立即消毒；若喷到眼镜和口罩、工作服上应立即更换，取下的防护用品放到指定容器内用新洁尔灭浸泡；若喷到暴露的皮肤上，应用0.1%新洁尔灭擦拭消毒，之后用流水冲洗干净。如有身体不适及时就医。

5.2.2 注射免疫过程中，如有泄露，及时应用0.1%新洁尔灭擦拭消毒，之后用流水冲洗干净；如注射针头刺入皮肤，请及时处理伤口、消毒，并就医。